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爍樸實(shí)驗(yàn)干貨 2
發(fā)布時(shí)間
2024-06-12
1、HE染色如何區(qū)分血管的內(nèi)膜、中膜和外模？
回答：這個(gè)可以對(duì)血管采用橫切的方法，會(huì)觀察到血管的三層結(jié)構(gòu)，內(nèi)膜由單層扁平內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成，較薄；中膜由平滑肌纖維和彈性纖維組成，較厚；外膜為輸送結(jié)締組織組成。
2、爬山細(xì)胞怎么做免疫組化，HE染色技術(shù)詳細(xì)步驟，詳細(xì)大佬
回答：您是指細(xì)胞爬片么。。。如果是細(xì)胞爬片，我給出以下步驟：
- 切片厚度4微米左右；
- 烤片37℃ 90min，脫蠟1h；
- PBS洗三次，每次5min；
- 3%過(guò)氧化氫 15min 避光；
- PBS洗三次，每次5min；
- EDTA抗原微波修復(fù)，高火至沸騰轉(zhuǎn)低火，再冷卻至室溫；
- 血清封閉，時(shí)間根據(jù)不同抗體不同組織變化；
- 甩干后滴加一抗，過(guò)夜或37度孵育；
- PBS洗三次，每次5min；
- 滴加二抗，通常1h；
- PBS洗三次，每次5min；
- DAB顯色，隨時(shí)鏡檢終止反應(yīng)；
- 流水沖洗；
- 蘇木素染色3min后反藍(lán)；
- 梯度脫水后封片鏡檢。
3、請(qǐng)問(wèn)一下，HE染色完畢到封片的時(shí)間間隔，最長(zhǎng)是多久呢？
回答：這個(gè)是在切片完全干后盡快封片為最好，之前我使用過(guò)性腺組織做過(guò)實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)種最長(zhǎng)放置一夜，第二天早上封片，結(jié)果沒(méi)有問(wèn)題。
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